জেলা প্রশাসকের কার্যালয়, খুলনা হলো খুলনা জেলার প্রধান সরকারি প্রশাসনিক কার্যালয়। জেলা প্রশাসক ও জেলা ম্যাজিস্ট্রেটের নেতৃত্বে পরিচালিত এই কার্যালয় জেলার সাধারণ প্রশাসন, ভূমি ও রাজস্ব ব্যবস্থাপনা, আইন-শৃঙ্খলা, স্থানীয় সরকার, উন্নয়ন কার্যক্রম এবং বিভিন্ন সরকারি সেবা ও সরকারি নির্দেশনা বাস্তবায়নে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। খুলনা জেলা ১৮৮২ সালে গঠিত হয় এবং এর প্রশাসনিক কার্যক্রমের কেন্দ্র হিসেবে জেলা প্রশাসকের কার্যালয় কাজ করে।